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    干細胞培養(yǎng)基作用與存放要求

    更新時間:2025-05-23點擊次數:432
      干細胞培養(yǎng)基是細胞培養(yǎng)的核心成分,其作用是為干細胞提供必要的營養(yǎng)、生長因子、pH緩沖和無菌環(huán)境,以維持細胞的存活、增殖和分化。
      一、干細胞培養(yǎng)基的作用:
      提供基礎營養(yǎng):
      氨基酸、糖類、維生素:為細胞代謝提供能量和原料。
      無機鹽:維持滲透壓和離子平衡。
      支持細胞生長與增殖:
      血清(如FBS胎牛血清):提供生長因子、激素、脂蛋白等,促進細胞貼壁和增殖。
      重組生長因子:誘導干細胞自我更新,抑制分化。
      維持pH穩(wěn)定:
      通過緩沖系統中和代謝產生的酸性物質,保持培養(yǎng)基pH在7.2~7.4范圍內。
      防止污染:
      添加抗生素預防細菌污染(注意:長期使用可能影響細胞狀態(tài))。
      培養(yǎng)基本身需無菌,通常經過過濾除菌。
      調節(jié)滲透壓:
      通過電解質濃度控制滲透壓,避免細胞因滲透壓失衡而破裂或皺縮。
      支持特定細胞需求:
      根據干細胞類型(如胚胎干細胞、間充質干細胞、神經干細胞)添加特異性成分。
      二、干細胞培養(yǎng)基存放要求:
      1. 未開封培養(yǎng)基的存放
      低溫保存:
      基礎培養(yǎng)基應存放于4℃冰箱,避免反復凍融。
      添加血清或生長因子后的培養(yǎng)基需根據成分調整:
      含血清的培養(yǎng)基:短期可存于4℃,長期(>1周)需-20℃冷凍,使用前解凍。
      無血清培養(yǎng)基:建議小量分裝,4℃保存(部分需-20℃)。
      避光保存:
      某些成分(如谷氨酰胺、生長因子)對光照敏感,需用錫箔紙包裹或存放在深色容器中。
      保質期限制:
      基礎培養(yǎng)基開封后建議1個月內用完,含血清的培養(yǎng)基最好2周內使用。
      2. 配制后培養(yǎng)基的存放
      無菌操作:
      配制時在超凈臺內完成,避免微生物污染。
      分裝至無菌容器(如培養(yǎng)瓶、離心管),密封后標記配制日期。
      短期存放:
      4℃保存,不超過1周(含血清培養(yǎng)基)。
      無血清培養(yǎng)基可存于4℃或按說明書要求冷凍。
      長期存放:
      冷凍,使用前需緩慢解凍。
      3. 特殊注意事項
      避免反復凍融:
      凍融會導致血清蛋白變性、生長因子失活,建議分裝成單次用量后冷凍。
      禁止陽光直射:
      存放位置遠離窗戶或強光,防止光敏成分降解。
      定期檢查:
      觀察培養(yǎng)基是否渾濁、沉淀或變色,若出現異常則丟棄。
     

     

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